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主流造模要领是通过外科手术结扎小鼠冠状动脉,,模拟血管壅闭。。以下是经口插管开胸结扎法的要害办法提要:
? 实验质料:
• C57小鼠(雄性,,6-8周)
• 阿佛丁。ǔЪ遥耗暇┌瓷锟萍加邢薰荆
• 通用型小动物麻醉机(厂家:瑞沃德 型号:R580S)
? 造模要领:
1、顺应性喂养7天,,小鼠凭证阿佛丁0.2ml/10g麻醉。。
2、颈部剪开,,钝性疏散出气管,,经口插管,,毗连呼吸机,,用先调解好的参数,,小鼠呼吸频率112,,吸呼比1:1,,潮宇量2.4, 钝性疏散胸腔左侧肌肉,,袒露肋间,,从第3肋和第4肋间撕开肌肉,,袒露心脏,,轻轻撕开一点心包膜,,用6-0带线缝合针于左心耳与动脉圆锥之间进针,,心电图ST抬高体现结扎乐成,,之后缝合好肋间肌肉和胸腔肌肉,,过5-10分钟撤掉呼吸机,,待老鼠恢复自主呼吸,,安排于笼内。。
3、造模完成后1-2周取材。。
? 评价指标:TTC染色,,Masson染色,,HE染色,,ELISA检测
1. 模子验证
♦ TTC染色

TTC染色效果:活心肌细胞内的脱氢酶可将TTC还原为红色,,而坏死心肌因酶活性损失呈惨白色。。
♦ Masson染色

Masson染色效果:胶原纤维被染成蓝色,,心肌细胞呈红色。。正常组当中,,少量胶原保存于心肌细胞间隙、血管周围。。模子组组织结构异常,,心肌及间质纤维化,,胶原沉积呈蓝色,,心肌组织间形成局部纤维瘢痕,,这是评估心肌纤维化的要害要领。。
♦ HE染色

HE染色效果:与正常组相比,,模子组组织松散水肿,,炎细胞浸润,,毛细血管增生;;;坏死的肌纤维被松散纤维结缔组织取代,,部分视野血管显着扩张。。
♦ ELISA检测
ELISA效果显示:模子组的血清MYO和CKMB浓度均显著高于正常组,,验证了此造模要领的有用性。。


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