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要领一:使用Curve Expert1.4软件(点击下载Curve Expert1.4)
标准曲线的绘制
可以接纳种种绘图软件来绘制ELISA标准曲线,,,,下面以“Curve Expert1.4”软件为例,,,,绘制ELISA标准曲线的要领如下;;;;
1.启动“Curve Expert”
2.X轴输入标准品的OD值(双抗夹心输入OD-空缺值),,,,Y轴输入所对应的浓度值,,,,如图:

3.单击[运行] 按钮,,,,泛起如下对话框

4.单击[ok]按钮,,,,泛起如下两个对话框,,,,关闭下面一个对话框


5. 在对话框的右上角泛起一些曲线的名称,,,,从“1”最先依次点击曲线名称,,,,在右下角会泛起响应拟合的曲线。。。。
(一样平常选择第一个多项式拟合)


6. 凭证拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击,,,,泛起如下对话框:
注重:选择系数(即“r”值)最好的曲线方程来举行运算。。。。在下面的对话框
右上角有“r”值
,,,,当“r”值越靠近1拟合度越好

7.按[Ctrl]键+[L]键,,,,泛起如下对话框:

8.输入标准的OD值,,,,单击[Calculate]按忸,,,,即可获得待测卵白的现实含量(标本稀释了N倍,,,,运算出的数值应在乘以N)。。。。
9. 如想获得ELISA拟合曲线的方程,,,,可在办法6的对话框空缺处右击,,,,选择”Information”

10. 获得如下对话框:点击“Copy”

在你需要的位置粘贴即可获得如下数据:
Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)
Coefficient Data:
a = -21.531017
b = 212.05019
c = -0.24054479
d = 0.018060778
11. 修改作图中X,Y坐标轴高度以及相关属性
选择办法9所示图中的第二排“Graph Properties”,,,,修改好后点击OK生涯
要领二: 使用OriginPro 2021软件盘算竞争法试剂盒ELISA效果
第一步:我们以PG(Progesterone) ELISA Kit 这个试剂盒为例


将标曲的数据复制粘贴在如下表框中

按下Ctrl+A键全选然后鼠标依次单击,,,,Analysis---Fitting---Nonlinear Curve Fit---Open Dialog...

在Function Selection选项卡中,,,,将 Category 参数设置为 Statistics
将Function参数设置为 Logistic

在Find X/Y选项卡中对 Find X from Y 举行勾选。。。,,,然后单击 Fit 键



横纵坐标选择Log10参数,,,,注重from / to 的上下限值的选择,,,,完成后单击OK 键


最后效果盘算,,,,竞争法由于OD值与样品浓度成反比关系,,,,以是不需要减去零孔配景值,,,,若是是夹心法的试剂盒,,,,则还需要事先在excel中减去配景值然后再依据教程举行盘算。。。。

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